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高压蒸汽灭菌锅你会使用吗?

2023-07-27 14:16:46 

高压蒸汽灭菌用途广,效率高,是微生物学实验中最常用的灭菌方法。一般培养基、玻璃器皿以及传染性标本和工作服等都可应用此法灭菌。

1高压蒸汽灭菌的原理

高压蒸汽灭菌的原理:是基于水的沸点随着蒸汽压力的升高而升高的原理设计的。当蒸汽压力达到1.05kg/cm2时,水蒸气的温度升高到121℃,经15~30min,可全部杀死锅内物品上的各种微生物和它们的孢子或芽孢。温度越高,需时越短,热穿透能力越强。一般认定115℃-121.3℃,对培养基的成分不产生破坏。

2高压蒸汽灭菌锅的优势

在一个标准大气压下水的沸点是100摄氏度,压力越高,与之对应压力下的沸点越高,高压蒸汽锅肯定要超过100摄氏度才能沸腾,才能产生蒸汽。至少要等到水煮沸,排出一分钟左右的蒸汽后再把安全阀关闭,这样可以使高压蒸汽锅里的压力迅速上升,原来沸腾的水因为压力的快速上升而停止沸腾,压力大,沸点高,水蒸汽就变成液体水,而放出大量的汽化潜热,就是高温高压的目的,从而达到杀菌的目的。在同一温度下,湿热的杀菌效力比干热大,其原因有三:

1、湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低;

2、湿热的穿透力比干热大;

3、湿热的蒸汽有潜热存在,每1克水在100℃时,由气态变为液态时可放出2.26kJ(千焦)的热量。这种潜热,能迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力。

3高压蒸汽灭菌使用细节

1、高压灭菌锅使用前要水加到水位线;

2、将需灭菌的培养基、蒸馏水或其它器皿放入灭菌锅内,关闭锅盖,检查排气阀、安全阀状态;

3、打开电源,检查参数设置是否正确,然后按下“work”键,灭菌锅开始工作,自动排冷气,到105℃时,底部排气阀门自动关闭,然后压力开始上升;

4、压力升至 0.15MPa(121℃)时,灭菌锅再次自动放气,然后开始计时,一般培养基灭菌20min,蒸馏水灭菌30min;

5、达到规定的灭菌时间后,关闭电源,打开放气阀缓慢放气,当压力指针降至 0.00MPa时,放气阀无蒸汽排出时,方可开启锅盖;

6、注意事项 :

a、气未放尽前,不得开启高压锅;

b、切忌将培养基封闭在锅内过夜;

c、压力表指针在0.05MPa以上时,不能过快放气。

4高压蒸汽灭菌常见错误的分析

高压灭菌锅操作中常见的错误有:

(1)排气不彻底。在升压前应将锅内冷空气排净,因空气是热不良导体,若不排净,冷空气就会聚集并滞留在灭菌锅中消毒筒的中下部,围绕在待灭菌物的周围,导致灭菌不彻底,可能造成大面积染菌。(自动的高压灭菌锅上下排气阀都要打开然后加热排空气)

(2)排气软管没有按要求插入灭菌筒的下部,或排气软管断裂、缺失。灭菌锅内的冷空气是通过排气软管排出的,上述情况将造成灭菌筒外的蒸汽直接经排气阀排出锅外,灭菌锅内的空气排放受阻。

(3)消毒筒内物品堆积太紧、太满,阻碍蒸汽的流通和热交换,使容器内升温减慢,造成物体内部杀菌不完全。

(4)升温过快。灭菌的时间是以达到要求温度后的持续时间计算的,但温度的升降过程同样起到杀菌的作用,升降温度过快会通过影响总的积温而影响灭菌效果。另外,升温过快,特别是使用外源蒸汽的情况下,会造成被灭菌物体内部升温滞后于压力表指示温度。

(5)灭菌的物体体积(容量)过大。组织培养中或常规微生物实验中,高温蒸汽灭菌通常要在121℃下保温15min。这一规定仅适用于试管、三角瓶中小于200ml容量的。若体积太大,特别是固体培养基,会造成灭菌不彻底,应适当延长灭菌时间。

(6)任意延长灭菌时间。规定的灭菌温度和时间是经过科学试验确定的,只要按照正确的灭菌程序是能达到灭菌目的的。但在实践中常有人为了“保证彻底灭菌”而任意延长灭菌时间。这样忽视了杀菌过程中温度对培养基成分的破坏作用,是得不偿失的。

(7)温度不稳定。灭菌过程中温度(压力)忽高忽低,特别是手提式电能灭菌锅,它没有控温装置,难于控温。操作者可配置调压变压器,通过调节电压控温,这样容易导致温度不稳定而灭菌不彻底。

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