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【实验技术】移液器的正确使用

2023-06-29 15:49:14 

最近发现很多新来的检测员,在使用移液枪时,存在较大的问题。移液枪已经逐渐取代了我们日常实验中使用的移液管,但是移液枪和移液管一样,同样有非常多的使用注意事项,只有正确的使用移液枪才能有效保障检测结果的准确性。接下来给大家介绍一下移液器的使用方法和注意事项。
移液八部曲:移液器情况检查;设定容量值;装枪头;预洗枪头;吸液;排液;退枪头;移液器清理归位。

移液枪状况检查

很多资料上都是写的移液器操作六部曲,但是我们认为,使用移液器首先要做的就是移液器的状况检查。检验内容可参考:刻度是否在正确位置,如果上次使用完,未调整到正确位置,就需要提醒,甚至需要重新校验;验证移液枪吸取的精度,经常使用移液器,都会大概知道液位的位置,要细心观察,当然可以进行精度检验;观察移液枪是否漏液的情况,对于老旧的移液器就要注意枪头和移液器结合不紧密,导致滴液的问题;另外试用一下移液器,感觉移液器吹吸是否正常,比如有出现移液器反弹不够利索,那就是出问题了;检查移液器和枪头接触位置是否满足你的要求,特别是在做微生物无菌操作的情况下。
再次强调移液器状况检查的重要性,拿一个不准确的移液器去做实验,带给你的只能是不准确的结果。
▼设定容量值

选定正确的移液器,在吸头最大量程的35-100%范围内操作可提高操作准确性与重复性。
在调节枪的过程中切忌超过最大或最小量程,以免损害移液枪的精确度。
避免“机械回冲”,当由小量程调节至大量程时,朝所需量程方向连贯旋转,旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程,这样可避免“机械回冲”,确保更高准确性。当由大量程调节至小量程时,直接连贯旋转至所需量程。

▼装枪头

正确的方法是将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合,不要过于用力。

在将枪头(pipette tips)套上移液枪时,很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下,这是错误的做法,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住。

▼预洗

用同一样品重复吸液排液二至三次。对于微量移液器,该操作有助于内壁吸附,并且可以使大量程吸头内部的空气等于样品温度,保证操作的一致性。

注意高温或者低温液体请不要润洗,温度对枪头的内部表面积会有影响,影响枪头的牢固程度和枪头吸附液体的量,影响精度。

有机液体和高挥发性液体,由于其挥发会在套筒内形成负压,从而产生漏液的情况,因此要增加预洗的次数至六次,使得套筒内气体饱和,避免漏液。

粘稠液体,预洗要慢,要保证预洗达到实际吸取液体的位置。

▼吸液

吸取液体时注意以下几点即可:速度适宜,减少枪头外壁沾有液体的量,是否有空气。

速度不能过快,过快就会吸入空气,过快你还需要等待(特别是对于粘稠的液体),或导致吸取不准确,吸取过快还容易导致液体进入移液器内部,特别是酸碱性物质,会损坏移液器。

减少枪头外壁沾有液体的量,进入液体内的深度要合适,不同的情况,并不相同,有时候沾有过多的液体,可以通过移液器和器皿壁的结合,来减少误差,对于对平行线要求较高的,微量移液操作,就要非常注意外壁沾取液体对实验的影响,在规范操作的前提下,维持操作的一致性。

▼放液

看了一些放液操作的介绍,其实我们认为,放液的核心就有一点:保证你吸取的液体全部进入你的体系内,并且每次的操作都是一致的。比如有人说枪头紧贴器壁放液,这对于小体积进入大容器就是非常不可取的。因此放液没有固定的什么方法,需要自己根据不同的情况去区别对待。

▼退枪头

枪头不要乱扔, 避免其进入下水道。

▼清理归位

对照前面移液器的状况检查,在使用完移液器后,要将移液器调回最大量程,检查移液器是否有污染物进入,并及时清理,将移液器放在合适的位置,避免损坏。


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