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为啥色谱柱的内径都是一些很零碎的数字

2021-11-19 15:27:07 


为啥色谱柱的内径都是一些很零碎的数字,比如:4.6mm;2.1mm,从来没有见到过5mm,10mm这种看上去让人赏心悦目的整数。


小编相信大部分人都有这样的疑问。

赛默飞色谱柱使用注意事项(1)

那么,是不是设计色谱柱的人脑子进了水,非要挑些奇怪的数字来消遣大家...看样子,明显不是,大家会发现,市面上大部分的色谱柱都是这些奇怪的内径规格,反而是那些带着整数值内径的色谱柱好像看上去和大家格格不入成为了异类。

到底是为什么?这一定是有什么原因的...那么原因是什么呢?

范德米特曲线

在液相色谱的基础理论中,我们总会听到一个如雷贯耳的名字,他叫范德米特,为了简便,我们称呼他叫做老范,他曾经在纸上画了一个对钩,用来解释色谱柱的柱效和流速的关系,后来,这个对钩出名了,被叫做“范德米特曲线”,成为了液相色谱分离当中最经典的理论之一。

这个是基于5um填料色谱柱绘制的范德米特曲线,为啥要选5um填料?主要是因为这个规格的填料从上世纪80年代产生,90年代兴盛到现在仍旧老当益壮经久不衰,堪称经典,另外,5um填料的范德米特曲线是个非常周正的对钩。

那么我们来解释一下这个经典的对钩吧,它被画在一个坐标轴里,横坐标表示谱带移动的线速度,纵坐标表示理论塔板高度。纳尼?线速度,理论塔板高度,这都是嘛?

这两个词确实生僻。所以,我们得把他们近似的翻译成接地气的词汇,那么他们可以近似的理解为:流速和柱效,对于给定的一根色谱柱(长度,填料粒径固定)越大的流速能产生越高的分析速度,越小的板高能产生越大的柱效;所以,在老范的对钩当中,横坐标数值越大,分析速度越快;纵坐标数值越小,柱子的分离效果越好。

知道了这些,我们就大概能理解老范画的这个对钩代表的意思了:对应一根固定的色谱柱:柱效随着流速提升而升高,到达一个最大值以后,又开始随流速增大而降低,这个让色谱柱达到最大柱效的流速值,被叫做最佳流速,在最佳流速附近保证实际柱效与最佳柱效差异很小的一个区域内的流速,被叫做最佳流速范围。所以老范的对钩的深层意义就是:谁在最佳流速使用色谱柱,我就给谁画个大对钩。

流速与内径

扯到这儿,一直在说老范和流速的事儿,还没和内径扯上一点关系,接下来,我们就要给老范和流速牵线搭桥了,这个牵线搭桥的人就叫内径。

在老范的大对钩中,横坐标叫做线速度,我们近似的把它认为是流速,其实,在“近似”的过程中,我们省略了内径这个因素,或者说是色谱柱粗细的影响。

线速度指的是色谱峰谱带移动的速度,通常用cm/min作为单位,

而流速指的是色谱仪输液的体积流速,通常用mL/min作为单位。

举上一个生活化的例子,就是汽车,线速度可以理解为汽车行驶的速度;流速可以理解为汽车烧油的速度,而不同内径的色谱柱,可以理解为不同大小的汽车,越粗的色谱柱代表着越大的汽车,要开到相同的速度,烧的油就多,所以,更粗的色谱柱需要更大的体积流速才能产生与细色谱柱相同的线速度/分析速度。

返回头看老范给画的大对钩,找个尺子一比,发现对于5um填料的色谱柱,最佳流速对应的是大概6cm/min这一点,不过,这是线速度,我们用的色谱仪都是需要设定体积流速的,刚才我们说过,体积流速和色谱柱内径是有关的,那么问题来了:色谱柱内径哪样好?

在这个问题上,设计色谱柱的人没有随便设计个1,2,5,10mm这种自己看了爽大家又喜闻乐见的内径数字,在这个问题上,他们秉承了“业界良心”。

大家想想看,自己在色谱仪上输入流速的时候,是输入1mL/min的感觉爽还是输入1.18mL/min的感觉爽?我相信,只要不是自虐倾向太强的同学,一定都会觉得是1mL/min更爽些...1mL/min对应的是4.6mm内径色谱柱的最佳流速,而1.18mL/min对应的是5mm内径色谱柱的最佳流速(都是说5um填料的色谱柱)。

现在大家明白为啥我说色谱柱的设计者有“业界良心”了吧,为了让大家在使用的时候爽,他们宁可让自己在做柱子的时候“不爽”,这是怎样的国际主义精神啊~

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