多数细胞培养时需37 ℃、5 %CO₂ 张力和饱和湿度的生长条件, CO₂ 培养箱提供了细胞生长环境。目前国内生物研究多数使用的是热导型培养箱, 每台4.5 万～ 5 .5 万元, 使用寿命10 年。从中南地区和我校报废维修资料看, 平均使用寿命是6.5 年, 其主要原因是传感器损坏。CO₂ 培养箱价格昂贵,我们期望它按期或过期服役, 为正确使用, 根据它的结构和性能要求, 现介绍CO2 培养箱的正确使用方法、常见故障的预防和处理。

1.温度传感器保护:培养箱温度由温度传感器控制, 它的正常运行需要25 ℃室温条件。常规使用时, 箱内放1 ～ 2 支水银温度计作为温度对照。温度传感器的正确运行, 使设定温度数、箱面显示数和箱内温度三者一致。当室温高于30 ℃时, 温度传感器调节功能失灵, 出现箱面显示温度高于设定数, CO₂ 培养箱内温度又高于箱面温度, 并常伴随警告声。此现象发生在白天,降低室温, 培养箱温度恢复正常运行。若发生在晚上, 持续高温使细胞死亡。为避免这一现象发生, 夏季使用培养箱时, 无菌室应保持25 ℃左右室温。

2.气体传感器保护: CO₂ 培养箱内气压由CO₂ 气体传感器控制。CO₂ 传感器正常反馈要求进气压为0 .06 兆帕。开门后, 箱内气体丢失, CO₂ 压力下降。关门后, CO₂ 传感器在低压刺激下有节奏地开闭, 向箱内慢慢充气, 当进气压达0 .06 兆帕时, 自动停止调节。换气瓶时, 部分实验者针对进气压, 采用加大进气压的快速充气法, 使用0.1 兆帕甚至0 .2 兆铂压力, 无形中损伤了CO₂ 传感器。开始这种损伤效应不能显示, 实验者不能察觉, 反复错误操作, CO₂ 传感器损伤累积最终致命损坏, 使气压调节失灵。当实验者发现培养基颜色变化异常、细胞生长缓慢时, 已无法挽救损坏。因此,正确的使用方法应该张贴在箱门, 使每个实验者都会操作。为防止漏气, 在气瓶出口处填胶皮, 气压表接头处缠封口带, 气瓶与气压表连接后, 利用肥皂水试验, 接口无气泡出现为连接合格。

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